石蜡包埋步骤 完成切片的制作流程 石蜡切片制作 切片制备
发布时间:2019/07/26
一、组织固定
按1:20将组织放入固定液。
二、组织脱水、渗透与包埋
1、组织脱水:
70% 乙醇(30min)→85%乙醇(30min) →95%乙醇(30min)→100%乙醇(30min)→100%乙醇(30min)。
需要注意的问题:
(1)若组织数量过多时,应分开脱水;
(2)脱水的体积至少为组织体积的4倍;
(3)乙醇纯度越高时,脱水的时间减少,否则引起组织过硬;
(4)最好能搅拌,使脱水充分;
2、透明:
二甲苯I (30min)→二甲苯II(30min)。
需要注意的问题:
在二甲苯的时间不宜过短或过长。时间过短引起透明不充分,影响后面渗透包埋;时间过长则引起组织变脆。
3、渗透:
石蜡1 (60min)→石蜡2(60min)→石蜡3(60min)
三、包埋
将组织放入在包埋模中,放上包埋盒,用包埋机热台进行包埋。将包埋好的组织放在石蜡包埋机的冷台上冷却。
需要注意的问题:
包埋时,注意一定要等冷却好后才取下包埋盒,不然石蜡容易粘在包埋模上。
四、石蜡切片
将包埋好的组织于石蜡切片机上进行切片,切片厚度约4μm。
五、摊片、烤片
将切好的组织蜡片,放于漂片机中展开,再将切片捞于载玻片上,进行烤片。